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membrana celular sin causar, por lo general, efectos letales. Lo más recomendable es
utilizar células blanco que se encuentren en suspensiones celulares, es decir, que sean
células a las que se les ha eliminado su pared celular, lo cual facilita la entrada del ADN
que se desea incorporar. Por su parte, el ADN que se desea introducir puede venir en
forma de plásmido o en cassettes de mínima expresión. Los plásmidos son ADN
circular que tienen las bacterias, adicional a su ADN genómico. Estos plásmidos se han
utilizado como vectores para transportar el ADN al nuevo huésped tanto en este método
de bombardeo de partículas, como en transformación usando otros microorganismos.
Los cassettes de mínima expresión son construcciones de genes pequeños que se
incorporan al ADN blanco.
Para el caso del bombardeo de partículas, se usan microproyectiles de forma
aproximadamente esférica (de 0.4 a 2.0 micrómetros de diámetro), hechos con
materiales densos como tungsteno u oro, y que se recubren con el ADN que se desea
transferir a las plantas. Para acelerar los microproyectiles, y que adquieran un
momentum (masa x velocidad) suficiente para penetrar a las células blanco, se utilizan
"macroproyectiles" que son impulsados a grandes velocidades por un choque de gas
(los microproyectiles son colocados sobre su superficie), que puede derivarse de una
explosión química, de la explosión eléctrica de una gota de agua o de una descarga de
un gas inerte. Las células o tejidos que constituyen el blanco de los proyectiles se
disponen de tal forma que presentan la máxima superficie para el bombardeo, en un
área de cerca de 5 cm de diámetro. Para lograrlo, se sugiere guardar una relación
celular de 0.2 ml de células por ml de medio, colocarlas luego en un papel filtro
Whatman #1 (para el caso de banano) y aplicar un vacío que asegure una mayor
homogeneidad celular. El proceso de bombardeo se muestra en la Figura 9.
Figura 9. Bombardeo con micropartículas. El macroproyectil es propulsado por una
descarga de helio a alta presión sobre las células blanco previamente preparadas.
Fuente: Herrera et al, 1997
Instituto de Agricultura, Recursos Naturales y Ambiente de la URL Serie técnica No. 15